【产品名称】

通用名称：同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法）

【包装规格】

试剂1（R1）：1×32ml；试剂2（R2）：1×10.5ml；

试剂1（R1）：2×20ml；试剂2（R2）：1×13ml；

试剂1（R1）：2×32ml；试剂2（R2）：2×10.5ml；

4x60T：（R1：16×3.8ml； R2：8×2.2ml）；

8x60T：（R1：32×3.8ml； R2：16×2.2ml）。

【预期用途】

供医疗机构用于人血清中同型半胱氨酸浓度的体外检测，用于辅助诊断。

【检验原理】

利用小分子捕获技术（SMT）的S-腺苷Hcy（SAH）水解酶的方法，在三-乙-羧乙基膦（TCEP）作用下，氧化型Hcy被转化为游离型Hcy，后者通过与共价底物S-腺苷甲硫氨酸反应，生成蛋氨酸和SAH。SAH被SAH水解酶水解成腺苷和Hcy，Hcy经循环反应放大信号，同时产生腺苷，腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使NADH转化为NAD⁺，样本中的Hcy含量与NADH转化速率呈正比。

【主要组成成分】

试剂1：

S-腺苷甲硫氨酸（SAM） 0.1mM

NADH > 0.2 mM

TCEP（磷酸三氯乙酯） > 0.5 mM

2-酮戊二酸 5.0 mM

试剂2：

谷氨酸脱氢酶 10KU/L

SAH水解酶 3.0 KU/L

腺苷脱氨酶 5.0 KU/L

Hcy 甲基转移酶 5.0 KU/L

不同批次试剂不得混用。

【储存条件及有效期】

试剂盒自生产之日起避光、密闭储存于2-8^oC，有效期为12个月。保存在生化仪上的开瓶试剂可以稳定保存30天。

生产日期及有效期见标签。

【适用仪器】

本产品主要适用于下列开放式全自动生化分析仪。建议用户在下列仪器上使用本产品前，根据实验室情况进行验证。

（1）HITACHI 7060、7080、7180、7600型号的开放式全自动生化分析仪

（2）OLYMPUS AU 400、AU640、AU2700、AU5400型号的开放式全自动生化分析仪

（3）Abbott C8000型号的开放式全自动生化分析仪

（4）Roche Modular P800型号的开放式全自动生化分析仪

（5）BECKMAN DXC800型号的开放式全自动生化分析仪

（6）迈瑞400，800型号的开放式全自动生化分析仪

（7）西门子RXL-MAX型号的全自动生化分析仪

（8）东芝120型号的开放式全自动生化分析仪

（9）东软400型号的开放式全自动生化分析仪

（10）Bayer ADVIA 1650/2400型号的开放式全自动生化分析仪

【样本要求】

新鲜的血清，样本收集之后要立即离心分离血清；假如不能立即离心，收集好的样本应该放在冰箱中保存，并且在一个小时内离心。溶血、混浊和脂血的样本不建议使用。经过分离的血清样本在室温可以保存4天，在0－8℃能保存几周，在－20℃能保存几个月。

【检验方法】

1.试验条件：主波长340nm，比色杯光径1.0cm，温度37℃。

2.试验方法：

△A=[(A2-A1)校准品管或样品管]-[(A2-A1)空白管]

以日立7060全自动生化仪为例，参数设置如下：

 

  3. 校准及质量控制程序：

在对样本进行检测时须使用商品化的、具有溯源性的校准品进行定标后，再对商品化的、具有溯源性的质控品进行检测，其检测结果必须在允许范围内，才能对样本进行检测。

4. 试验结果的计算方法：

以同型半胱氨酸校准品的标示浓度为横坐标（X），以同型半胱氨酸校准品的实际测定吸光度值（ΔA）为纵坐标（y），进行非线性拟合，如spline、logit等，绘制标准曲线，将待测样本的测定吸光度值（ΔA）代入标准曲线，即可得出相应待测样本同型半胱氨酸（Hcy）的浓度（μmol/L）。

【参考区间】

参考范围是≤15μmol/L，建议各实验室确立所服务人群的参考范围。

【检验结果的解释】

样本中血红蛋白≤1200mg/dL、胆红素≤20mg/dL、甘油三脂≤2500mg/dL、维生素C≤10mmol/L、胱硫醚≤20μmol/L时对测定无干扰。

【检验方法的局限性】

1. 本试剂的线性范围0～50μmol/L，当样本中同型半胱氨酸浓度高于50μmol/L时，应该用水稀释后再测定，结果乘以相应稀释倍数。

2. 本试剂保存于2~8^oC，不可冻存。

3. 试剂应该是清澈的，若变混浊或初始吸光度小于0.800A（340nm，光径1.0cm）应该丢弃。

 4. S-腺苷同型半胱氨酸会引起明显的正干扰，但正常人体血浆中含SAH的量极低，不会对测试结果造成干扰。

5. 病人可能因为摄入某些药物引起同型半胱氨酸升高：如甲氨蝶呤、卡马西平、苯妥英、含氮的氧化物，抗惊厥剂等。

6. 不能检测含有3-偶氮腺苷的样本。

【产品性能指标】

1外观：在自然光条件下进行目视检测，产品主要原材料的外观要求如下：

试剂1：无色澄清液体；

试剂2：无色至淡黄色澄清液体；

2 净含量：≥标示量。

3试剂空白吸光度（340nm、37℃&1.0cm光径）：≥0.800A。

4分析灵敏度：试剂测试10μmol/L的同型半胱氨酸样本时，吸光度差值ΔA≥0.01A

5线性：线性在0～50μmol/L范围内：

a)线性相关系数（r）≥0.995；

b) 线性偏差不超过±10%，绝对偏差应不超过±1.0μmol/L（零点计算用）。

6精密度：

6.1重复性CV≤5.0%（样本浓度为10.0±2.0μmol/L），CV≤3.0%（样本浓度为20.0±4.0μmol/L）；

6.2批间相对极差≤10%（样本浓度为10.0±2.0μmol/L）。

7准确度：测试可用于评价常规方法的参考物质，结果与标示值的相对偏差应不超过±15%。

8稳定性：试剂盒自生产之日起避光，密闭储存于2~8℃，可稳定12个月。

【注意事项】

1. 本试剂盒仅供体外诊断使用。

2. 不同批号的试剂不得混用。

3. 试剂中含有防腐剂叠氮化钠，请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触，即用大量清水冲洗。请勿吞服。

4. 试剂盒的测定结果仅作为各种疾病的临床辅助诊断依据。

5. 试剂和样本的用量可根据仪器的不同比例改变。

6. 校准品虽然对其潜在的危险已经处理过，但仍需按照人源样本对待。

7. 校准品中含有甘油，全自动分析仪要按照日常清洗程序进行清洗，以免试剂覆盖在试剂针上。

【参考文献】

1《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》（试行）

2《临床实验室参考范围的定义和确定》

3 2006年东南大学出版社出版的《全国临床检验操作规程》第三版

4《临床化学体外诊断试剂（盒）通用技术要求》