【产品名称】

通用名称：结核分枝杆菌抗体（IgG）检测试剂盒（酶联免疫法）

【包装规格】

48人份/盒、96 人份/盒。

【预期用途】

本产品用于定性检测人血清或血浆中结核分枝杆菌抗体(IgG)。

本产品检测结果仅供临床参考，不得作为确诊或排除的唯一依据。ELISA检测结核病患者抗体还不能严格区分是近期感染、既往感染，还是隐性感染，尚不能作为疗效考核的依据。但活动性肺结核抗结核抗体阳性率明显高于既往结核分枝杆菌感染患者，两组之间阳性率具有显著差异，说明血清或血浆中结核抗体检测对于鉴别活动性肺结核和既往结核分枝杆菌感染患者具有辅助诊断价值。

【检验原理】

本品由基因重组表达的结核分枝杆菌多表位融合抗原包被酶联板，加待测血浆或血清，如待测样品中存在结核抗体，形成抗原抗体特异结合，再加入抗人IgG 酶标抗体与其反应 ，经酶底物显色，以颜色的深浅判断样品中结核抗体。

【主要组成成分】

（1） TB-抗原包被板                1块 96人份  1块48人份

（2） 酶结合物                         20mL×1瓶   6mL×1瓶

（3） 阳性对照                          1mL×1瓶   1mL×1瓶

（4） 阴性对照                          1mL×1瓶   1mL×1瓶

（5） 洗涤液（用前1：20稀释）       50mL×1瓶   30mL×1瓶

（6） 显色剂 A                           6mL×1瓶        3mL×1瓶

（7） 显色剂 B                           6mL×2瓶   3mL×1瓶

（8） 终止液                           6mL×1瓶   3mL×1瓶

（9） 样品稀释液                     20mL×1瓶   6mL×1瓶

（10）不干胶片                         3张              3张

试剂组成：

组份2酶结合物：Na₂HPO₄.12H₂O 2.9g/L；NaCL 8g/L；KCL 0.2g/L；KH₂PO₄ 0.2g/L；复合酶稳定剂AES 0.6g/L；辣根过氧化物酶保护剂1.0g/L；小牛血清 500mL/L；山羊血清 500mL/L；指示剂1 1.3mL/L；硫柳汞1g/L；抗-TB-HRP适量。

组份3阳性对照：Na₂HPO₄.12H₂O 2.9g/L；NaCL 8g/L；KCL 0.2g/L；KH₂PO₄ 0.2g/L；乙二醇 150mL/L；小牛血清 250mL/L；硫柳汞1g/L；指示剂1 1.25mL/L；阳性血清适量。

组份4阴性对照：Na₂HPO₄.12H₂O 2.9g/L；NaCL 8g/L；KCL 0.2g/L；KH₂PO₄ 0.2g/L；乙二醇150mL/L；硫柳汞1g/L；阴性血清250mL/L。

组份5洗涤液: NaCL 160g/L；Na₂HPO₄.12H₂O 58g/L；KCL 4g/L；KH₂PO₄ 4g/L；Tween-20 10mL/L。

组份6显色剂A：柠檬酸8g/L；8-羟基喹啉0.004g/L；冰醋酸2.4mL/L；过氧化尿素0.7g/L。

组份7显色剂B：柠檬酸2.1g/L；乙二胺四乙酸二钠0.38g/L；TMB 0.4g/L。

组份8终止液：浓硫酸110mL/L。

组份9样品稀释液：Tris Base 2.4g/L；NaCL 17.8g/L；酪蛋白钠5g/L；牛血清白蛋白2g/L；吐温-20 1mL/L；曲拉通X-100 1mL/L；山羊血清50mL/L；硫柳汞0.4g/L。

需要但未提供的物品：新鲜的蒸馏水或去离子水、一次性手套、精确的微量移液器和洁净的吸头、干净的吸水纸、37℃恒温箱或水浴锅、计时器、洗板机或洗瓶、振荡器。

【储存条件及有效期】

2～8℃保存，有效期12个月。

生产日期及有效期见标签。

   【适用仪器】

自动酶标测定仪，波长：450nm

【样本要求】

（1）样本采集不需要特殊准备，不需要受检者禁食。

（2）样本可使用血清或血浆，柠檬酸、肝素或EDTA等抗凝剂不会影响实验结果。

（3）高度溶血的样本、没完全收缩的血清样本以及有微生物污染的样本会引起错误的结果，可导致假阳性率上升。

（4）尽可能采用新鲜血检测，样本保存在室温下不要超过8小时。

（5）如果不能在8小时内完成检测，请将样本置2～8℃冷藏保存；如果不能在48小时内完成检测，或者需要将样本进行运输，请将样本置-20℃或更低温度冷藏。

（6）冷冻样本在解冻之后，检测前必须充分混匀；样本应避免反复冻融，否则会造成样本中IgG蛋白聚合，可导致假阳性率上升，也可导致真阳性检出率下降。

【检验方法】

（1）每次试验设阴性、阳性对照各两孔、分别加入阴、阳性对照血清100μL，再设一孔空白对照，加样品稀释液100μL。其余孔加入100μL样品稀释液，再加待测血清10μL。充分混匀后，置37℃温育30分钟。弃去孔内样品，扣干。

（2）用洗涤液注满每孔（至少300μL洗涤液/孔），勿溢出，静置5秒钟后扣干，重复5次。

（3）每孔加酶结合物100μL（空白对照孔除外），置37℃温育20分钟，同上法洗反应板5次。

（4）每孔加显色剂A液、B液各50μL，轻轻振荡后，37℃避光静置10分钟。

（5）每孔加入终止液50μL终止反应，以空白调零，在酶标仪中读取各孔OD450。

【检验结果的解释】

（1）测定：以酶标仪单波长450nm 或双波长450nm/630nm测定各孔OD值。（用单波长测定时需设空白对照孔。）

阳性对照每孔OD值≥0.8；0.00< 阴性对照OD值≤0.12。

（2）临界值（Cutoff）计算：阴性对照平均OD值＋0.12。

备注：阴性对照OD值低于0.06，以0.06计算，高于0.06按实际值计算。

(3) 结果解释:样品OD值≥临界值（Cutoff）为结核抗体阳性；样品OD值﹤临界值（Cutoff）为结核抗体阴性。

【检验方法的局限性】

本品仅用于检测血清或血浆中结核抗体，用于体外检测，结核病人辅助诊断。

【产品性能指标】

（1） 结核分枝杆菌抗体企业参考品检定结果：

（2）对临床400例标本检测结核分枝杆菌抗体检测结果：

肺结核病人标本：（122+104）/252×100%=89.68%

结核性胸膜炎病人标本：（7+15）/27×100%=81.48%

肺外结核病人标本：（2+13）/21×100%=71.4%

总敏感度病人标本：（122+104+7+15+2+13）/(252+27+21)×100%=87.67%

特异性：（100-7）/100×100%=93%

总样本符合率：（263+93）/400×100%=89.00%

（3）检测试剂盒对类风湿关节炎，红斑狼疮，甲状腺异常，糖尿病以及肺部感染患者样本进行测定的试验，以观察与相关疾病交叉反应性。结果在163例样品中假阳性率为8%。与文献报道假阳性率4.6-11.3%基本一致；说明试剂与上述疾病具有一定的交叉反应性，另外也可能与受试者生活在结核病高度流行环境，个体隐性感染有关，但目前没有发病，特别是肺部感染疾病。

（4）主要干扰物高血脂（甘油三酯浓度含量不高于2.1mmoL/L）、高胆固醇（胆固醇浓度含量不高于8.5mmoL/L）和血红蛋白（血红蛋白浓度不高于210g/L）对本品的干扰试验结果表明，三种干扰物均不影响本品的检测结果。

【注意事项】

（1）浓缩洗涤液使用前，用蒸馏水稀释20倍后使用。

（2）不同批号试剂不可混合使用。

（3）必须严格控制温育反应板的温度和时间。

（4）结果判定以仪器测定为准，不能凭肉眼观察。