【产品名称】

通用名称：抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP) 检测试剂盒 （酶联免疫法）

【包装规格】

48 人份/盒、96 人份/盒

【预期用途】

该产品供医疗机构用于定性测定人血液中抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)或定量测定人血液中抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)浓度 ，用于辅助诊断。

【检验原理】

本品采用间接ELISA法检测抗CCP抗体，其基本原理是：包被的抗原为环瓜氨酸肽（CCP），包被在酶标板表面，将稀释后的待检血清/血浆和对照物加入反应板孔中，如果被检血清/血浆中存在抗环瓜氨酸肽抗体，经温育后，则血清/血浆中抗环瓜氨酸肽抗体与反应板孔中的 CCP抗原多肽结合，形成固相抗原-抗体复合物，洗去未结合的血清/血浆中其它成分，加入酶标记的抗人IgG抗体，温育，固相CCP抗原结合抗CCP抗体再与酶标记的抗人IgG抗体结合，洗去未结合的酶标记抗体成分，加入酶底物，并被催化成为有色产物。根据颜色的深浅可对抗环瓜氨酸肽抗体进行定量或定性测定。

【主要组成成分】

酶结合物：Na₂HPO₄.12H₂O；NaCl；KCl；KH₂PO₄；小牛血清；山羊血清；指示剂1；硫柳汞；酶标抗人IgG。

样品稀释液：Tris Base；NaCl；酪蛋白钠；牛血清白蛋白；吐温-20；曲拉通X-100；山羊血清；硫柳汞。

抗CCP阳性对照及校正品稀释液：Na₂HPO₄.12H₂O；NaCl；KCl；KH₂PO₄；乙二醇；小牛血清；硫柳汞；指示剂1。

抗CCP阴性对照： Na₂HPO₄.12H₂O；NaCl；KCl；KH₂PO₄；硫柳汞；乙二醇；阴性血清；指示剂2。

阳性对照：抗CCP阳性对照及校正品稀释液；阳性血清。

弱阳性对照：抗CCP阳性对照及校正品稀释液；阳性血清。

显色剂A：柠檬酸；过氧化尿素。

显色剂B：柠檬酸；乙二胺四乙酸二钠；TMB。

终止液： 浓硫酸。

洗涤液： Na₂HPO₄.12H₂O；NaCl；KCl；KH₂PO₄；吐温-20。

主要组成：

【储存条件及有效期】

储存条件：于2-8℃保存，在有效期内使用

有效期：12 个月

生产日期及失效期见标签。

【适用仪器】

自动酶标测定仪，主波长：450nm，参考波长：630nm

【样本要求】

血清或血浆，由静脉采血后离心获得，不能反复冻融,标本在2-8℃可保存一周。

【检验方法】

（1）每次试验设空白对照一孔（不加样品及酶标试剂，其余各步相同），阴性对照、阳性对照、弱阳性对照各两孔，定量检测时还需设校正品5个浓度各一孔。待测样本用样品稀释液1：100稀释后加100μl到微孔板中，混匀置37℃温育60分钟。弃去孔内样品，扣干。

（2）用洗涤液注满每孔（至少400μl洗涤液/孔），勿溢出，静置5秒钟后扣干，重复5次。

（3）每孔分别加入100μl酶结合物，室温孵育30分钟。同上法洗反应板5次。

（4）每孔加显色剂A液、B液各50μl，轻轻振荡后，37℃避光静置15分钟。

（5）每孔加入终止液50μl终止反应，以空白调零，在酶标仪中读取各孔OD450。

【检验结果的解释】

1、 对于定性测定：

(1) 结果计算：各测定吸光度值（包括对照和样品）减去空白对照值，然后计算对照和样品的绝对吸光度比值：

                     对照或样品吸光度值(OD450)

吸光度比值=-----------------------------

                     弱阳性对照吸光度值(OD450)

2、对于定量诊断：

（1）结果计算：以5个校正品（校正品A 100 RU/ml、校正品B 50 RU/ml、校正品C 25 RU/ml、校正品D 12 RU/ml、校正品E 6 RU/ml）的相对浓度（Log函数，X-轴）及其吸光度（线性，Y-轴）作标准曲线，据此求出血清中抗-ccp抗体的浓度。可用计算机采用曲线拟合方式来绘制标准曲线：四参数对数、五参数对数、spline拟合、对数/对数曲线或lim/limit曲线。如果血清样本的吸光度超出了校正品A（100RU/ml）,诊断结果可报告为＞100RU/ml。同时建议选择一个适当的稀释倍数将血清重新稀释后再测定，如1：400，从标准曲线计算出的数据乘以4即为样本中ccp抗体浓度。

（2）结果判断：≤12RU/ml：阴性

＞12RU/ml：阳性

【检验方法的局限性】

本品仅用于体外检测血清或血浆中抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)，用于类风湿性关节炎病人的辅助诊断。

【产品性能指标】

1生物安全性：用于制备阳性对照品、弱阳性对照品、阴性对照品的血清，需经生物安全性检测即乙型肝炎病毒表面抗原检测为阴性、丙型肝炎病毒抗体检测为阴性、人类免疫缺陷病毒（HIV-1/2）抗体检测为阴性。

2试剂外观：液体组分应为澄清液体。

3装量：试剂装量≥标示装量。

4试剂空白吸光度：≤0.05。

5试剂灵敏度：测定试剂盒内校准液E（相当于6RU/ml），吸光度范围在0.06-0.16。

6准确度：测定试剂盒内校准液B（相当于50RU/ml），吸光度范围在1.0-2.0。

7线性范围：在6～100RU/ml范围内，计量-反应曲线的相关系数（r）≥0.95。

8阴性参考品符合率：对10份阴性参考品测定，应全部检出阴性。

9阳性参考品符合率：对10份阳性参考品测定，应全部检出阳性。

10精密性：用精密性参考品测定,CV≤15％（n=10）。

11稳定性试验：37℃放置6天或2-8℃12个月检定结果应达到上述2、4～10标准。

【注意事项】

（1）浓缩洗涤液使用前，用蒸馏水稀释20倍后使用。

（2）不同批号试剂不可混合使用。

（3）必须严格控制温育反应板的温度和时间。

（4）结果判定以仪器测定为准，不能凭肉眼观察。

（5）当阳性对照OD值≥1.80并且阴性对照OD≤0.12时实验结果是有效的。

医疗器械生产企业许可证编号：沪食药监械生产许20030955号

【医疗器械注册证编号/产品技术要求编号】

【说明书核准日期及修改日期】