【药品名称】

通用名称：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：Diagnostic Kit for Hepatitis B Virus Surface Antigen (ELISA) 

汉语拼音：Yixing Ganyan Bingdu Biaomian Kangyuan Zhenduan Shijihe (Meilianmianyifa)

【包装规格】

48人份/盒、96人份/盒、576人份/盒

【预期用途】

乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒适用于定性测定人血清或血浆中乙型肝炎病毒表面抗原，可用于血液筛查及临床乙型肝炎病毒感染的辅助诊断。

【检验原理】

         乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒采用双抗体夹心法检测HBsAg，采用抗-HBs包被板条，用HRP标记的抗-HBs为酶标记物，以四甲基联苯氨（TMB）和过氧化物为底物。当标本中存在HBsAg时，该HBsAg与包被抗-HBs结合并与抗-HBs-HRP结合形成抗-HBs-HBsAg-抗-HBs-HRP复合物，加入TMB底物产生显色反应，反之则无显色反应。在实验结束时，有颜色变化的，提示有HBsAg存在，无颜色或颜色变化微弱的，则提示不存在HBsAg。

【主要组成成份】

      注意：不同批号试剂盒中试剂盒组成1、2 不可混用。

【其他所需物品和仪器】

1. 新鲜的蒸馏水或去离子水

2. 一次性手套

3. 精确的微量移液器和洁净的吸头

4. 干净的吸水纸

5. 37℃恒温箱或水浴锅

6. 计时器

7. 洗板机或洗瓶

8. 振荡器

9. 酶标仪 检测波长450nm，参考波长630nm

【储存条件及有效期】

  试剂盒应置2～8℃中避光保存，有效期12个月。

【样本要求】

1. 样本采集不需要特殊准备，不需要受检者禁食，按照正常的采血技术收集血液，全血样品最好先放置37℃处理2小时，再将血样品充分离心，3000转/分钟离心6分钟以上，使血清（浆）不含或极少含血细胞。如果为抗凝血样品，应将血样品充分离心后，最好再放置室温2小时以上。

2. 样本可使用血清或血浆，柠檬酸、肝素或EDTA等抗凝剂不会影响实验结果。

3. 样本中含用叠氮钠会影响实验的结果，高度溶血的样本、没完全收缩的血清样本或有微生物污染的样本可能会引起错误的结果。

4. 新鲜的样本在2～8℃无菌条件下可保存一星期，新鲜样本可长期贮存在-20℃或以下，避免反复冻融。

【检验方法】

1. 实验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将浓缩洗涤液作1：20稀释。

2. 加待测标本：每次试验设阴性、阳性对照各两孔，分别加入阴、阳性对照0.1毫升，空白对照1孔，其余各孔加入待测标本0.1毫升, 置37℃孵育60分钟。

3. 加酶结合物：每孔0.05毫升，空白对照孔不加，充分混匀，置37℃孵育30分钟。

4. 洗板：1）手工洗板：弃去反应板条孔内液体，在吸水纸上拍干；用洗涤液注满每孔，静置5-10秒，弃去孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。

2）洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，洗液应注满每孔，并确保每次吸净无残留，最后在吸水纸上拍干。

5. 加显色剂： 先加显色剂A，每孔0.05毫升； 再加显色剂B，每孔0.05毫升；充分混匀，放置37℃避光孵育30分钟。

6. 终止反应： 每孔加入终止液0.05毫升，混匀。

7. 测定：用酶标仪读数，可选择单波长450 nm（以空白孔校零）或双波长450/630 nm，读取各孔OD值。读数须在终止反应后10分钟内完成。

【参考值】

1. 阴性对照平均值小于0.1、阳性对照平均值大于1.2，实验结果有效。

2. 阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算。

3. Cutoff 值计算： COV = 阴性对照平均OD值×2.1。

【检验结果的解释】

    1. 标本OD值≥COV为阳性，标本OD值＜COV为阴性。

2. 阴性结果表明样本中不含HBsAg，或样本中的HBsAg含量低于试剂盒的检测范围。

3. 阳性结果表明样本中含有HBsAg，或非特异反应因素。

4. 阳性结果的样本需要再进行重复实验，只有经过重复或再重复实验仍为阳性结果的样本，可认为是HBsAg阳性。所有重复结果为阳性的样本应经过适当的手段进行确认

阳性结果的样本如复检为阴性结果应被认为是阴性样本，重复不出阳性结果可能属于下列一个或多个技术问题引致：

1)由于仪器或加样器造成的交叉污染。

2)显色剂被金属离子污染。

3)由于试剂滴漏造成的交叉污染。

4)不充分的洗板或最后吸去不彻底。

【检验方法的局限性】

     所有高敏感性的免疫实验系统都存在潜在的非特异性反应，所以重复的阳性结果应以一个适当的方法进行确认。

【产品性能指标】

1. 试剂外观：液体组分应澄清。

2. 阴性参考品符合率：用国家参考品进行检定，不得出现假阳性。

3. 阳性参考品符合率：用国家参考品进行检定，检测3份浓度值大于5×10⁴IU/ml的HBsAg阳性参考品，不得出现假阴性。

4. 最低检出量：用国家参考品进行检定，HBsAg adr、adw及ay亚型的最低检出量符合要求。

5. 精密性：用精密性参考品测定，CV（%）应不高于15%（n=10）。

6. 稳定性试验：试剂各组分置37℃6天，检定结果达到以上标准。

7. 装量：≥标示装量。

【注意事项】

1. 检验方法中洗板的质量至关重要，既避免洗液过量溢出，又能充满反应微孔中，洗板次数不应少于5次，并经常注意检查加液头是否堵塞。

2. 手工洗板时，请勿使用带纸屑的吸水材料拍板，以防外源性过氧化物酶类似物或氧化还原物质与显色剂发生反应，影响检测结果的准确性。

3. 洗板时所用的吸水纸请勿反复使用。

4. 洗板机最好在每次使用前、后，用蒸馏水或去离子水冲洗干净，以防止管路堵塞或腐蚀。

5. 如果有任何试剂接触皮肤和眼睛，必须用大量清水对该部位进行扩大清洗和消毒；终止液为硫酸，具有腐蚀性。

6. 试剂盒内有关组份及临床样本均应视为有潜在传染性，请按相关的实验室工作规范来执行和处理。

7. 如使用全自动酶免分析系统，可能会存在系统的误差，应对系统参数设定作适当调整，以满足国家相关质控品要求。

【药品生产许可证编号】:沪20160052

【产品批准文号】国药准字S10950045

【产品标准编号】YBS00412010

【说明书批准及修改日期】