【药品名称】

通用名称：丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：Diagnostic Kit for Antibody to Hepatitis C Virus (ELISA)

汉语拼音：Bingxing Ganyan Bingdu Kangti Zhenduan Shijihe (Meilianmianyifa)

【包装规格】

48人份/盒、96人份/盒、576人份/盒

【预期用途】

本试剂盒采用ELISA法检测血清或血浆标本丙型肝炎抗体，适用于血液的筛查及临床丙型肝炎病毒感染的辅助诊断。

【检验原理】

采用ELISA间接测定法，在预包被有丙肝抗原的反应孔内加入待测标本，若标本中有抗HCV，则可在微孔板表面形成抗原-抗体复合体，再与酶标抗人IgG结合，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物，经显色系统显色后，根据OD 值判定有无HCV抗体的存在。

【主要组成成份】

注意：不同批号试剂盒中试剂盒组成1、2 不可混用。

【储存条件及有效期】

1、储存条件：2～8℃。

2、有效期：12个月。

【适用仪器】

1、 微量移液器和洁净的吸头

2、 37℃恒温箱或水浴箱

3、 计时器

4、 洗板机

5、 振荡器

6、 酶标仪 检验波长450nm，参考波长630nm

【样本要求】

1、样本采集不需要特殊准备，按照正常的采血技术收集血液，全血样品最好先放置37℃处理2小时，再将血样品充分离心，3000转/分钟离心10分钟以上，使血清或血浆不含或极少含血细胞。如果为抗凝血样品，应将血样品充分离心后，最好再放置室温2小时以上。

2、样本可使用血清或血浆，柠檬酸、肝素或EDTA等抗凝剂不会影响实验结果。

3、样本中含用叠氮钠会影响实验结果，高度溶血的样本，没完全收缩的血清样本或微生物污染的样本可能会引起错误的结果。

4、新鲜的样本在2～8℃无菌条件下保存一星期，新鲜样本可长期储存在-20℃或以下，避免反复冻融。

【检验方法】

1、每次试验设阴性、阳性对照各两孔，分别加入阴、阳性对照100μl，再设一孔空白对照，加样品稀释液100μl。其余孔加入100μl样品稀释液，再加待测血清10μl。充分混匀后，置37℃温育60分钟。弃去孔内样品，拍干。

2、洗板：1）手工洗板：弃去反应板条孔内液体，在吸水纸上拍干；用洗涤液注满每孔，勿溢出，静置5-10秒，弃去孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。

2）洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，洗液应注满每孔，并确保每次吸净无残留，最后在吸水纸上拍干。

3、每孔加酶结合物100μl（空白对照孔除外），置37℃温育30分钟，同上法洗反应板5次。

4、每孔加显色剂A液、B液各50μl，轻轻振荡后，37℃避光静置30分钟。

5、每孔加入终止液50μl终止反应，以空白调零，在酶标仪中读取各孔OD450。

【参考值】

1、阴性对照平均值小于0.1、阳性对照平均值大于1.2，实验结果有效。

2、实验设计要求阳性、阴性对照OD值之差应大于1.2，否则本次实验无效。

3、若阴性对照读数小于0.050时，按0.050计算。

4、临界值（Cut off value）=阴性对照平均值+0.1。

【检验结果解释】

1、测试标本的OD值小于Cut off value则为HCV抗体阴性。测试标本的OD值等于或大于Cut off value则为HCV抗体阳性

2、阴性结果表明样本中不含有抗-HCV，或样本中的抗-HCV含量低于试剂盒的检测范围。

3、阳性结果表明样本中含有抗-HCV，或非特异反应素。

4、阳性结果的样本需要再进行重复实验。所有重复结果为阳性的样本应经过适当的手段进行确认。

1） 由于仪器或加样器造成的交叉污染。

2） 显色剂被金属离子污染。

3） 由于试剂滴漏造成的交叉污染。

4） 不充分的洗板或最后吸去不彻底。

【试验方法的局限性】 

本品仅用于检测血清或血浆中抗-HCV，用于体外检测，临床辅助诊断

【产品性能指标】

1、检测30份HCV抗体国家阴性参考品，阳性反应不得多于1份（≧29/30）

2、检测30份HCV抗体国家阳性参考品，阴性反应不得多于1份（≧29/30）。

3、用4份HCV抗体国家最低检出限参考品，阳性反应不得少于2份，且基质血清为阴性。

4、用1份HCV抗体国家精密性参考品进行检定，CV(%)应不高于15%(n=10)。

5、稳定性实验：试剂各组分置37℃至少6天，检定结果应达到标准。

 【注意事项】

1、 本品仅用于体外诊断，仅限于检测人体血清、血浆，检测结果作为诊断指示之一。

2、 从2～8℃条件下取出的样本应置室温平衡30分钟再进行检测。

3、 须确保样品加样量的准确，如果加样不准确，可能会导致错误的实验结果。

4、 使用微量移液器手工加样时，每次应该更换吸头吸取样本。

5、 在操作过程中应尽量避免反应微孔中产生气泡。

6、 浓缩洗涤液系高浓度磷酸盐，可能会形成结晶，如未完全溶解，会影响实验结果，同时可能会堵住自动加样器或洗板机管道。若出现结晶，请放置37℃充分溶解，然后稀释混匀使用。

7、 封板胶纸不能重复使用。

8、 用水浴锅反应时，请将反应板浸放于水中1/3，底部以网格支撑物支撑，水温控制在37℃。

9、洗板：
1）以洗板机洗板时，洗板机的加液量至关重要，既避免洗液过量溢出，又能充满反应微孔中，洗板次数不应该少于5次，并经常注意检查加液头是否堵塞。

2）手工洗板时，请勿使用带纸屑的吸水材料拍板，以防外源性过氧化物酶类似物或氧化还原物质与显色剂发生反应，影响检测结果的准确性。

3）洗板时所用的吸水纸请勿反复使用。

4）洗板机最好在每次使用前、后用蒸馏水或去离子水清洗干净，以防止管道堵塞或腐蚀。

10、如使用全自动酶标分析系统，可能会存在系统的误差，应对系统参数设定做适当调整，以满足国家相关质控品要求。

11、如果有任何试剂接触皮肤和眼睛，必须用大量清水对该部位进行扩大清洗和消毒；终止液为硫酸，具有腐蚀性。

12、试剂盒内有关组份及临床样本均视为有潜在传染性，请按相关的实验室工作规范来执行和处理。